O vírus da hepatite B crônica (HBV) pode evoluir para cirrose e carcinoma hepatocelular (CHC). Um estudo publicado no Journal of Molecular Diagnostics descreve um novo exame HBV que oferece vantagens sobre os métodos atualmente utilizados, pois tem a capacidade de detectar DNA circular fechado (cccDNA) no soro, em células isoladas e em amostras de tecido preservadas. Este exame pode ser utilizado para diagnosticar o CHC numa fase anterior para gerir o tratamento de forma mais eficaz.
“O desenvolvimento do CHC está fortemente associado ao HBV. Recentemente, várias novas estratégias antivirais direcionadas ao cccDNA foram estabelecidas para melhorar a depuração do HBV. É de grande significado clínico fornecer uma abordagem precisa e sensível para a detecção do cccDNA. Com este método, mais e mais pacientes com HBV crônico terão tratamento de precisão disponível para prevenir ou retardar a ocorrência, pois o CHC poderia ser diagnosticado em um estágio anterior”, explicou o investigador principal Song-Mei Liu, MD, PhD, doCenter for Gene Diagnosis -Zhongnan Hospital of Wuhan University, Wuhan – China.
O novo exame utiliza PCR digital por gotas (ddPCR), que é altamente sensível e preciso para detectar partes de vírus em moléculas. Combinando ddPCR com PCR, os pesquisadores foram capazes de detectar cccDNA em soro, células individuais e tecidos de tumor fixados em formalina ou envolvidos em parafina.
Southern blotting, atualmente considerado o padrão-ouro para este fim, e outros exames, têm limitações importantes como menos sensibilidade do que o ddPCR na detecção de números baixos de cópias de cccDNA. Outros métodos requerem a obtenção de tecido hepático através de biópsia hepática. “Comparado com a biópsia hepática, o soro pode ser obtido de forma não invasiva, é amplamente utilizado para fins de diagnóstico clínico e tem uma distribuição homogênea de cccDNA. O exame também melhora o limite de detecção de cccDNA”, observou o Dr. Liu.
O ddPCR foi útil para identificar quais pacientes poderiam estar abrigando carcinoma hepatocelular. Os pesquisadores descobriram que quase 90% dos 68 pacientes com CHC eram positivos para cccDNA, comparados a 53% dos 79 pacientes não portadores de CHC. O número de cópias séricas de cccDNA foi maior em pacientes com CHC em comparação com pacientes não portadores de CHC. A análise combinada de cccDNA sérico e HBV-DNA distinguiu pacientes com CHC de pacientes não portadores de CHC. “Isso implica o cccDNA como um fator de risco para HCC”, disse o Dr. Liu.
Os pesquisadores também foram capazes de confirmar que o cccDNA sérico estava positivamente correlacionado com os níveis de cccDNA medidos em amostras de fígado. “O cccADN sérico é de fato um marcador diagnóstico muito melhor e útil do que o cccADa intra-hepático”, disse o Dr. Liu. Recentemente, várias novas estratégias antivirais visando o cccDNA foram encontradas para melhorar a depuração do HBV. Portanto, fornecer uma abordagem precisa e sensível para a detecção do cccDNA é de grande significado clínico para o diagnóstico precoce e predição do CHC, tratamento direcionado e avaliação da eficácia do tratamento.
Fan Shen, MD, PhD, do Departamento de Medicina Laboratorial e Patologia da Universidade de Alberta, Edmonton, AB, Canadá, observou: “A quantificação de cccDNA sérico e HBV-DNA é uma maneira eficaz de discriminar pacientes com CHC de pacientes não CHC com uma sensibilidade de 74,5 por cento e uma especificidade de 93,7 por cento. Este é um achado importante e pode levar a um diagnóstico precoce do CHC e uma previsão mais precisa do progresso crônico do HBV de uma maneira não invasiva”.
De acordo com a Organização Mundial de Saúde, 257 milhões de pessoas em todo o mundo estão infectadas com HBV, e em 2015 o HBV resultou em 887.000 mortes, principalmente devido a complicações hepáticas. A infecção crônica pelo HBV pode ser tratada com medicamentos como o tenofovir ou o entecavir. Em 2015, apenas nove por cento dos indivíduos que vivem com infecção por HBV estavam cientes de que estavam infectados.
